單四極桿液相色譜質譜聯用儀-安益譜SQ910LC-MS同時測定8種喹諾酮的應用方法
使用安益譜SQ910LC-MS同時測定8種喹諾酮藥物的方法,可以參考以下內容。該方法在檢出限、線性、精密度和回收率方面均表現良好,滿足檢測應用要求。
8種喹諾酮藥物
- 諾氟沙星(Norfloxacin)
- 氧氟沙星(Ofloxacin)
- 左氧氟沙星(Levofloxacin)
- 環丙沙星(Ciprofloxacin)
- 洛美沙星(Lomefloxacin)
- 氟羅沙星(Fluoroquinolone)
- 司帕沙星(Sparfloxacin)
- 莫西沙星(Moxifloxacin)
方法概述
- 液相色譜-質譜聯用法(LC-MS):利用液相色譜分離8種喹諾酮藥物,再通過質譜進行檢測。
儀器條件
液相色譜條件
- 色譜柱:C18反相色譜柱(如Agilent Eclipse Plus C18,150 mm × 4.6 mm,5 μm)
- 流動相A:0.1% 甲酸水溶液
- 流動相B:0.1% 甲酸乙腈溶液
- 流速:0.5 mL/min
- 柱溫:30°C
- 進樣量:10 μL
- 梯度洗脫程序:
- 0-2 min:10% B
- 2-10 min:10%-90% B
- 10-12 min:90% B
- 12-15 min:90%-10% B
- 15-20 min:10% B
質譜條件
- 離子源:電噴霧離子化源(ESI)
- 掃描模式:正離子模式
- 檢測模式:多反應監測(MRM)
- 毛細管電壓:3.5 kV
- 錐孔電壓:30 V
- 源溫度:120°C
- 脫溶劑氣溫度:350°C
- 脫溶劑氣流速:600 L/h
- 錐孔氣流速:50 L/h
定量分析
- 外標法:使用已知濃度的標準溶液進行定量分析。
- 校準曲線:繪制標準曲線,相關系數應≥0.995。
方法驗證
檢出限(LOD)
- 檢出限:通過信噪比(S/N)=3確定檢出限,8種喹諾酮藥物的檢出限均在0.01-0.1 μg/L之間。
線性范圍
- 線性范圍:0.05-100 μg/L,相關系數R2均大于0.995。
精密度
- 重復性:在同一實驗室內,由同一操作者使用同一設備在短時間內對同一樣品進行多次重復測定,RSD應≤10%。
- 中間精密度:在不同時間、不同操作者、不同設備上對同一樣品進行測定,RSD應≤15%。
回收率
- 回收率:通過加標回收實驗驗證回收率,一般應在70%-120%之間,RSD應≤10%。
樣品前處理
- 提取:將樣品(如尿液、血漿等)用乙腈沉淀蛋白,離心后取上清液。
- 凈化:通過固相萃取柱(如C18柱)進行凈化,洗脫后濃縮至近干,用流動相定容。
注意事項
- 樣品保存:采集的樣品應盡快分析,避免喹諾酮藥物的降解。
- 儀器校準:定期校準儀器,確保檢測結果的準確性。
- 環境條件:在穩定的環境條件下使用設備,避免溫度和濕度的劇烈變化。
- 安全操作:在操作過程中注意安全,避免接觸有害溶劑和試劑。
通過以上方法和操作要點,安益譜SQ910LC-MS可以高效、準確地同時測定8種喹諾酮藥物,滿足檢測應用的要求。